咳喘寧膠囊對穩期慢性阻塞性肺疾病患者氣道炎癥影響及療效評價.pdf
孫杰+韓敏娟+張旭輝+等
摘要：目的 觀察咳喘寧膠囊對慢性阻塞性肺疾?。–OPD）穩定期患者氣道炎癥細胞及炎性介質的影響。方法 采用隨機數字表法將110例COPD穩定期患者隨機分為治療組和對照組各55例。2組均予復方異丙托溴銨溶液氣霧吸入。同時，治療組口服咳喘寧膠囊，每次4粒，每日3次；對照組口服等劑量安慰劑膠囊。療程均為3個月。觀察痰炎癥細胞分類計數、血清及痰上清液中炎癥因子水平。結果 治療組治療后痰中性粒細胞下降（P<0.05）、巨噬細胞增多（P<0.05），與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05）。2組治療前后血清白細胞介素（IL）-6、IL-8、白三烯B4（LTB4）水平差異無統計學意義（P>0.05）；治療組治療后痰上清液IL-6、IL-8、LTB4水平均下降（P<0.05），與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論 咳喘寧膠囊對穩定期COPD患者氣道炎癥細胞及炎性介質釋放有明顯的抑制作用。
關鍵詞：咳喘寧膠囊；慢性阻塞性肺疾??；白細胞介素-6；白細胞介素-8；白三烯B4；隨機對照試驗
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.09.006
中圖分類號：R259.63 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2014）09-0021-04
慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以持續氣流受限為特征的疾病，且氣流受限呈進行性發展。目前西醫治
基金項目：甘肅省科技支撐計劃（1011FKCA095）
療穩定期COPD多以抗炎解痙平喘為主。咳喘寧膠囊具有扶正固本、化痰活血、止咳平喘之功效，對慢性支氣管炎、COPD等有一定療效。筆者采用隨機、單盲、安慰劑平行對照臨床試驗方法，通過觀察咳喘寧膠囊對COPD穩定期患者氣道炎癥細胞及炎性介質的影響，探討其治療COPD的作用機制，現報道如下。
1 資料與方法
1.1 病例來源
110例納入病例均為甘肅中醫學院附屬醫院呼吸科2011年1月-2013年1月就診的COPD穩定期患者。
1.2 診斷與納入標準
①符合中華醫學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組制定的“慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）”[1]相關標準；②輕、中度穩定期COPD患者，臨床穩定期被限定為4周內無急性發作和未改變治療方案；③年齡>50歲，男女不限；④患者對治療方案知情，并簽署知情同意書。
1.3 排除標準
①活動性肺結核、肺癌、明顯支氣管擴張、塵肺及其他肺限制性通氣功能障礙者；②合并心血管、神經、內分泌、血液、肝、腎等嚴重系統疾患和惡性腫瘤者；③不愿配合和完全不能交流者。
1.4 試驗設計
本試驗采用隨機、單盲、安慰劑平行對照臨床試驗方法，單盲對象為受試者。試驗中注意隨機方法的隱藏，用SAS統計分析系統PROCPLAN過程語句，給定種子數，生成隨機數字表，由與本試驗無關的專人控制分配方案，按隨機數字表將對應的分組代碼裝入信封。臨床醫生按順序號依次納入受試者時拆開信封，按其中的分組代碼將受試者分入不同的處理組，每組55例。本研究經甘肅中醫學院附屬醫院臨床研究倫理委員會批準并備案。
1.5 治療方法
2組患者均予復方異丙托溴銨溶液（商品名：可必特，每撳含異丙托溴銨20 μg、硫酸沙丁胺醇120 μg，上海勃林格殷格翰藥業有限公司，批號937320），每次2撳，氣霧吸入，每日4次。治療組同時予咳喘寧膠囊（甘肅中醫學院附屬醫院制劑中心，批號20110317， 0.5 g/粒），每次4粒，每日3次，口服。對照組同時予安慰劑膠囊（甘肅中醫學院附屬醫院制劑中心提供，主要成分為淀粉，外形同咳喘寧膠囊），用法、用量同治療組。連用3個月。觀察期間出現急性發作，按“慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）”[1]中相關方案進行治療。
1.6 觀察指標與方法
1.6.1 痰標本的收集及處理 吸入沙丁胺醇氣霧劑（葛蘭素史克制藥有限公司，批號 BB0031）200 μg， 10 min后超聲霧化吸入3%高滲鹽水，霧化量0.4 mL/min，霧化時間5～10 min。將痰置于無菌干燥的培養皿中，挑選出黏液部分放入無菌干燥試管中稱重，加入4倍量0.1%二硫蘇糖醇（DDT），37 ℃水浴15 min，以有效溶解痰液，再加入4倍量磷酸鹽緩沖液（0.01 mmol/L， pH 7.4）充分洗滌細胞5 min，2000 r/min離心10 min，取上清液-70 ℃保存待測，沉淀留作痰細胞學檢查。
1.6.2 痰細胞分類計數 制備痰細胞學涂片2～3張，油鏡下觀察2次不同涂片的視野中200個有核細胞，分類計數中性粒細胞、淋巴細胞、巨噬細胞及嗜酸性粒細胞，計算平均數，得出各種細胞所占百分率。
1.6.3 血清樣本收集 采靜脈血3～5 mL，2000 r/min離心15 min，抽取1 mL血清，-70 ℃保存待測。
1.6.4 痰上清液和血清炎性介質檢測 白細胞介素（IL）-6、IL-8、白三烯B4（LTB4）采用雙抗夾心酶聯免疫吸附法測定。檢測試劑盒由上海巧伊生物科技有限公司提供，批號 20130207。操作步驟按試劑盒說明書進行，采用美國BIO-RAD公司生產酶標儀測定。
1.6.5 安全性檢查 用藥前后檢測肝、腎功能，觀察咳喘寧膠囊不良反應。
1.7 統計學方法
采用SPSS17.0統計軟件進行分析。計量資料以 —x±s描述，采用t檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。
2 結果
2.1 一般資料
110例穩定期COPD患者中，因去外地生活和工作脫落5例，其中治療組3例、對照組2例；中止試驗3例，其中治療組1例、對照組2例，患者分別在入院后5、7、11 d因感染中止試驗；死亡1例，系治療組，患者于二次住院時合并感染搶救無效死亡。因以上9例治療未超過一半療程，故未納入統計，僅作原始數據和不良反應記錄。最終納入患者101例，治療組50例，男34例，女16例，年齡62～78歲，病程3.5～17年；對照組51例，男37例，女14例，年齡64～79歲，病程4～15年。2組性別、年齡、病程比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。
2.2 2組治療前后痰液炎癥細胞分類比較
排除誘導痰后部分無痰液患者，治療組、對照組分別納入35、34例進行統計。痰液炎癥細胞分類比較結果見表1。
2.4 臨床安全性評價
治療組治療后肝、腎功能指標未見明顯異常變化（P>0.05），未見明顯不良反應。
3 討論
COPD患者肺內炎癥細胞以肺泡巨噬細胞、中性粒細胞和CD8+T細胞為主。激活的炎癥細胞釋放多種炎性介質，其中IL-6、IL-8、LTB4是參與氣道炎癥的重要細胞因子。
中醫認為，本病多因久病肺虛，痰飲內生，日久則痰濁、水飲、血瘀互相影響而發病?？却瓕幠z囊中烈香杜鵑為君藥，以止咳、祛痰、平喘；黃芩、浙貝母、百部為臣藥，其中黃芩苦寒善清肺熱，浙貝母清熱化痰止咳，百部潤肺止咳，三藥相伍既可清肺，又可潤肺，配合君藥，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪術破日久郁積之痰瘀；淫羊藿補腎壯陽，納氣平喘，固一身陽氣之根本。諸藥合用，共成扶正固本、活血化瘀、潤肺止咳平喘之劑。針對COPD本虛標實、痰瘀互結的基本病機，以扶正祛邪，標本兼顧。
IL-6和IL-8是中性粒細胞和T淋巴細胞的重要趨化因子，可增加局部炎性細胞，從而促進甚至加重氣道炎癥反應，并在一定程度上反映氣道炎癥的嚴重程度。IL-6參與COPD的氣道炎癥和氣道重塑，在高濃度時可損傷血管內皮細胞，促進免疫黏附，微血栓形成，造成肺損傷，還可延緩中性粒細胞凋亡，使中性粒細胞在炎癥部位數量增多，釋放超氧陰離子增多，加重炎癥反應，最終引起小氣道和肺泡組織結構和功能的改變。IL-8與中性粒細胞表面特異性受體結合，導致細胞變形反應、脫顆粒反應、呼吸爆發反應、釋放溶酶體、形成超氧化物，從而促進炎癥反應。研究表明，COPD患者痰中中性粒細胞數目與第1秒用力呼氣容積呈負相關[2]，說明IL-8在一定程度上反映了COPD患者氣流阻塞程度，并可作為估計氣道炎癥嚴重性以及COPD危險因素的指標。LTB4可募集活化中性粒細胞，使之生成過量炎性產物，擴大局部炎癥反應[3]，參與COPD的發病。巨噬細胞作為調節COPD氣道炎癥和參與氣道重構的靶細胞，對小氣道和肺泡隔的炎癥起了主要促進作用。巨噬細胞也可產生LTB4，而且其活性受白三烯的影響。LTB4作用于支氣管管壁，使支氣管平滑肌收縮，支氣管管腔變窄，氣道阻力明顯增高，氣管和支氣管壁毛細血管通透性增加，滲出增多，蛋白質和水分漏出，引起黏膜水腫。
本研究表明，COPD患者氣道炎性細胞及炎性介質水平增高，這與Wanner A等[4]的研究結果相符?，F代藥理研究表明，烈香杜鵑含有大量揮發油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛細血管滲透性達到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向漿液腺轉化，減輕炎性細胞浸潤程度，使管腔內容物減少，有利于炎癥吸收和上皮功能恢復[6]；黃芩甲醇提取物可通過抑制免疫細胞的功能及促炎因子的產生而發揮抗炎作用[7]，浙貝母有效成分浙貝甲素和浙貝乙素對卡巴膽堿引起的豚鼠離體氣管條收縮有明顯抑制作用[8]，提示浙貝母很可能是通過作用于氣管壁M受體舒張氣管。本研究顯示，治療組氣道痰炎癥細胞分類計數及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差異有統計學意義（P<0.05， P<0.01），表明咳喘寧膠囊能抑制COPD穩定期患者氣道炎癥細胞及炎癥介質的釋放，從而減少中性粒細胞在氣管內募集，減輕COPD患者的氣道慢性炎癥。
參考文獻：
[1] 中華醫學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組.慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）[J].中華結核和呼吸雜志，2013，36（4）：255- 264.
[2] Yamamoto C， yoneda T， Yoshikawa M， et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8[J]. C beast， 1997，112：125-128.
[3] Crooks SW， Stockley RA. Leukotriene B4[J]. Int J Biocliem Cell Biol，1998，30：173-178.
[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
2.2 2組治療前后痰液炎癥細胞分類比較
排除誘導痰后部分無痰液患者，治療組、對照組分別納入35、34例進行統計。痰液炎癥細胞分類比較結果見表1。
2.4 臨床安全性評價
治療組治療后肝、腎功能指標未見明顯異常變化（P>0.05），未見明顯不良反應。
3 討論
COPD患者肺內炎癥細胞以肺泡巨噬細胞、中性粒細胞和CD8+T細胞為主。激活的炎癥細胞釋放多種炎性介質，其中IL-6、IL-8、LTB4是參與氣道炎癥的重要細胞因子。
中醫認為，本病多因久病肺虛，痰飲內生，日久則痰濁、水飲、血瘀互相影響而發病。咳喘寧膠囊中烈香杜鵑為君藥，以止咳、祛痰、平喘；黃芩、浙貝母、百部為臣藥，其中黃芩苦寒善清肺熱，浙貝母清熱化痰止咳，百部潤肺止咳，三藥相伍既可清肺，又可潤肺，配合君藥，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪術破日久郁積之痰瘀；淫羊藿補腎壯陽，納氣平喘，固一身陽氣之根本。諸藥合用，共成扶正固本、活血化瘀、潤肺止咳平喘之劑。針對COPD本虛標實、痰瘀互結的基本病機，以扶正祛邪，標本兼顧。
IL-6和IL-8是中性粒細胞和T淋巴細胞的重要趨化因子，可增加局部炎性細胞，從而促進甚至加重氣道炎癥反應，并在一定程度上反映氣道炎癥的嚴重程度。IL-6參與COPD的氣道炎癥和氣道重塑，在高濃度時可損傷血管內皮細胞，促進免疫黏附，微血栓形成，造成肺損傷，還可延緩中性粒細胞凋亡，使中性粒細胞在炎癥部位數量增多，釋放超氧陰離子增多，加重炎癥反應，最終引起小氣道和肺泡組織結構和功能的改變。IL-8與中性粒細胞表面特異性受體結合，導致細胞變形反應、脫顆粒反應、呼吸爆發反應、釋放溶酶體、形成超氧化物，從而促進炎癥反應。研究表明，COPD患者痰中中性粒細胞數目與第1秒用力呼氣容積呈負相關[2]，說明IL-8在一定程度上反映了COPD患者氣流阻塞程度，并可作為估計氣道炎癥嚴重性以及COPD危險因素的指標。LTB4可募集活化中性粒細胞，使之生成過量炎性產物，擴大局部炎癥反應[3]，參與COPD的發病。巨噬細胞作為調節COPD氣道炎癥和參與氣道重構的靶細胞，對小氣道和肺泡隔的炎癥起了主要促進作用。巨噬細胞也可產生LTB4，而且其活性受白三烯的影響。LTB4作用于支氣管管壁，使支氣管平滑肌收縮，支氣管管腔變窄，氣道阻力明顯增高，氣管和支氣管壁毛細血管通透性增加，滲出增多，蛋白質和水分漏出，引起黏膜水腫。
本研究表明，COPD患者氣道炎性細胞及炎性介質水平增高，這與Wanner A等[4]的研究結果相符?，F代藥理研究表明，烈香杜鵑含有大量揮發油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛細血管滲透性達到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向漿液腺轉化，減輕炎性細胞浸潤程度，使管腔內容物減少，有利于炎癥吸收和上皮功能恢復[6]；黃芩甲醇提取物可通過抑制免疫細胞的功能及促炎因子的產生而發揮抗炎作用[7]，浙貝母有效成分浙貝甲素和浙貝乙素對卡巴膽堿引起的豚鼠離體氣管條收縮有明顯抑制作用[8]，提示浙貝母很可能是通過作用于氣管壁M受體舒張氣管。本研究顯示，治療組氣道痰炎癥細胞分類計數及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差異有統計學意義（P<0.05， P<0.01），表明咳喘寧膠囊能抑制COPD穩定期患者氣道炎癥細胞及炎癥介質的釋放，從而減少中性粒細胞在氣管內募集，減輕COPD患者的氣道慢性炎癥。
參考文獻：
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[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
2.2 2組治療前后痰液炎癥細胞分類比較
排除誘導痰后部分無痰液患者，治療組、對照組分別納入35、34例進行統計。痰液炎癥細胞分類比較結果見表1。
2.4 臨床安全性評價
治療組治療后肝、腎功能指標未見明顯異常變化（P>0.05），未見明顯不良反應。
3 討論
COPD患者肺內炎癥細胞以肺泡巨噬細胞、中性粒細胞和CD8+T細胞為主。激活的炎癥細胞釋放多種炎性介質，其中IL-6、IL-8、LTB4是參與氣道炎癥的重要細胞因子。
中醫認為，本病多因久病肺虛，痰飲內生，日久則痰濁、水飲、血瘀互相影響而發病?？却瓕幠z囊中烈香杜鵑為君藥，以止咳、祛痰、平喘；黃芩、浙貝母、百部為臣藥，其中黃芩苦寒善清肺熱，浙貝母清熱化痰止咳，百部潤肺止咳，三藥相伍既可清肺，又可潤肺，配合君藥，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪術破日久郁積之痰瘀；淫羊藿補腎壯陽，納氣平喘，固一身陽氣之根本。諸藥合用，共成扶正固本、活血化瘀、潤肺止咳平喘之劑。針對COPD本虛標實、痰瘀互結的基本病機，以扶正祛邪，標本兼顧。
IL-6和IL-8是中性粒細胞和T淋巴細胞的重要趨化因子，可增加局部炎性細胞，從而促進甚至加重氣道炎癥反應，并在一定程度上反映氣道炎癥的嚴重程度。IL-6參與COPD的氣道炎癥和氣道重塑，在高濃度時可損傷血管內皮細胞，促進免疫黏附，微血栓形成，造成肺損傷，還可延緩中性粒細胞凋亡，使中性粒細胞在炎癥部位數量增多，釋放超氧陰離子增多，加重炎癥反應，最終引起小氣道和肺泡組織結構和功能的改變。IL-8與中性粒細胞表面特異性受體結合，導致細胞變形反應、脫顆粒反應、呼吸爆發反應、釋放溶酶體、形成超氧化物，從而促進炎癥反應。研究表明，COPD患者痰中中性粒細胞數目與第1秒用力呼氣容積呈負相關[2]，說明IL-8在一定程度上反映了COPD患者氣流阻塞程度，并可作為估計氣道炎癥嚴重性以及COPD危險因素的指標。LTB4可募集活化中性粒細胞，使之生成過量炎性產物，擴大局部炎癥反應[3]，參與COPD的發病。巨噬細胞作為調節COPD氣道炎癥和參與氣道重構的靶細胞，對小氣道和肺泡隔的炎癥起了主要促進作用。巨噬細胞也可產生LTB4，而且其活性受白三烯的影響。LTB4作用于支氣管管壁，使支氣管平滑肌收縮，支氣管管腔變窄，氣道阻力明顯增高，氣管和支氣管壁毛細血管通透性增加，滲出增多，蛋白質和水分漏出，引起黏膜水腫。
本研究表明，COPD患者氣道炎性細胞及炎性介質水平增高，這與Wanner A等[4]的研究結果相符?，F代藥理研究表明，烈香杜鵑含有大量揮發油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛細血管滲透性達到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向漿液腺轉化，減輕炎性細胞浸潤程度，使管腔內容物減少，有利于炎癥吸收和上皮功能恢復[6]；黃芩甲醇提取物可通過抑制免疫細胞的功能及促炎因子的產生而發揮抗炎作用[7]，浙貝母有效成分浙貝甲素和浙貝乙素對卡巴膽堿引起的豚鼠離體氣管條收縮有明顯抑制作用[8]，提示浙貝母很可能是通過作用于氣管壁M受體舒張氣管。本研究顯示，治療組氣道痰炎癥細胞分類計數及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差異有統計學意義（P<0.05， P<0.01），表明咳喘寧膠囊能抑制COPD穩定期患者氣道炎癥細胞及炎癥介質的釋放，從而減少中性粒細胞在氣管內募集，減輕COPD患者的氣道慢性炎癥。
參考文獻：
[1] 中華醫學會呼吸病學分會慢性阻塞性肺疾病學組.慢性阻塞性肺疾病診治指南（2013年修訂版）[J].中華結核和呼吸雜志，2013，36（4）：255- 264.
[2] Yamamoto C， yoneda T， Yoshikawa M， et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8[J]. C beast， 1997，112：125-128.
[3] Crooks SW， Stockley RA. Leukotriene B4[J]. Int J Biocliem Cell Biol，1998，30：173-178.
[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
